大分子樣品檢測(cè)用什么色譜柱？
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大分子樣品檢測(cè)通常需要根據(jù)樣品的性質(zhì)(如分子量、極性、酸堿性等)選擇合適的色譜柱。以下是一些常見(jiàn)色譜柱類(lèi)型及其適用場(chǎng)景：
1.?反相色譜柱（RP-HPLC）
反相色譜柱適用于分離和分析蛋白質(zhì)、肽段等生物大分子。其特點(diǎn)是使用非極性固定相(如C4、C8、C18)和極性流動(dòng)相，通過(guò)疏水作用實(shí)現(xiàn)分離。例如：
恒譜生 C8-Bio 色譜柱：適用于蛋白質(zhì)、多肽、抗體藥物等大分子生物樣品的檢測(cè)，具有高選擇性和良好的穩(wěn)定性。
月旭 Xtimate C4 300? 色譜柱：適用于蛋白質(zhì)、多肽等生物大分子的分析，具有高柱效、長(zhǎng)壽命和寬pH耐受性。
2.?尺寸排阻色譜柱（SEC）
尺寸排阻色譜(SEC)通過(guò)分子大小(流體動(dòng)力學(xué)半徑)進(jìn)行分離，適用于分析蛋白質(zhì)、抗體、核酸等生物大分子。例如：
安捷倫 AdvanceBio SEC 色譜柱：適用于超大分子(如腺相關(guān)病毒AAV、病毒樣顆粒VLP等)的分析，提供500 ?和1000 ?孔徑規(guī)格，能夠?qū)崿F(xiàn)高分離度和快速分析。
恒譜生 Bio-SEC 色譜柱：適用于多種生物大分子，如蛋白質(zhì)、核酸、抗體等，提供120 ?、300 ?等不同孔徑規(guī)格，滿足不同分子量范圍的檢測(cè)需求。
3.?疏水相互作用色譜柱（HIC）
HIC適用于分析蛋白質(zhì)等生物大分子，通過(guò)疏水基團(tuán)與樣品的相互作用實(shí)現(xiàn)分離。通常用于抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)的藥物抗體比(DAR)分析。
4.?離子交換色譜柱（IEX）
離子交換色譜柱通過(guò)樣品的電荷特性進(jìn)行分離，適用于蛋白質(zhì)、肽段等生物大分子的分析。選擇柱子時(shí)需根據(jù)樣品的等電點(diǎn)(pI)選擇合適的陽(yáng)離子或陰離子交換柱。
5.?親和色譜柱
親和色譜柱通過(guò)特異性配體與目標(biāo)分子的結(jié)合實(shí)現(xiàn)分離，如Protein A親和色譜柱常用于IgG抗體的純化。
選擇建議
分子量較大：優(yōu)先選擇孔徑較大的SEC色譜柱(如300 ?、500 ?、1000 ?)。
需要高分辨率：選擇反相色譜柱(如C4、C8)。
樣品酸堿性較強(qiáng)：選擇耐酸堿性較強(qiáng)的色譜柱。
如果需要更具體的建議，可以提供樣品的具體信息(如分子量、極性等)，以便進(jìn)一步優(yōu)化選擇。
發(fā)布于: 2025-03-10